【摘要】：目的诱导人胚胎生殖细胞(hEGC)向心肌细胞分化,初步探讨其定向分化过程及调控机制。方法组织块培养法体外培养hEGC,采用抗坏血酸诱导hEGC向心肌细胞分化,通过CCK-8法测定诱导后心肌细胞增殖率,免疫荧光法检测心肌连接蛋白Cx43的表达;利用半定量RT-PCR的方法鉴定hEGC和诱导后心肌细胞GATA-4和ACTC1等基因的表达;结合生物信息学方法推断分化过程中各蛋白的相互作用关系。结果诱导后细胞阳性表达Cx43,且表现出一定的增殖能力;其表达GATA-4、ACTC1等基因的强度与未经诱导的hEGC均有所不同;GATA-4、Nkx2.5与各类心肌肌钙蛋白有着密切的联系。结论 hEGC能诱导分化为心肌细胞;蛋白质组学方法可以协助探讨其分化过程及调控机制。
【正文快照】：
人胚胎生殖细胞(human embryonic germ cell,hEGC)是胚胎生殖腺嵴中的原始生殖细胞(primor-dial germ cell,PGCs)经体外培养获得的一种胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)。hEGC与源于胚泡内细胞群(inner cell mass,ICM)的ESC相似,能在体外未分化状态下无限增殖,并在合适条...
