微生物限度检查沙门菌检查实验:取四硫磺酸盐培养基18-24小时增菌培养物划线于胆盐硫乳琼脂平板或MCC琼脂平板,培养18-24小时,当阳性对照的平板呈现阳性菌落时,供试品的平板无菌落生长或有菌落但不同于典型菌落形态特征时,可判为未检出沙门菌。如供试品的胆盐硫乳琼脂平板上典型菌落形态为无色至浅橙色半透明,菌落中心带黑色或全部黑色或无黑色,在MCC琼脂平板上典型菌落为无色至淡红色、半透明或不透明,菌落中心有时带黑色或可疑者,均应挑选可疑菌落2-3个接种三糖铁琼脂片面上,阳性对照同时接种该培养基,培养18-24小时后,阳性对照斜面应为红色,底层为黄色。硫化氢阳性而供试品的疑似菌斜面未见红色,底层未见黄色,可判为未检出沙门菌,否则,应继续作以下试验。
靛基质实验:照大肠杆菌项下操作并判断结果。
脲酶试验:取可疑菌落培养物接种于脲琼脂培养基斜面上,培养24小时,斜面变为红色为阳性,培养基颜色无改变为阴性。
氰化钾试验:分别用白金耳蘸取可疑菌株的营养肉汤液一环接种至对照培养基及氰化钾培养基,立即用橡胶塞塞紧,培养24-48小时。对照管应有菌生长,试验管有菌生长者为阳性,无菌生长者为阴性。
赖氨酸脱羧酶试验:取可疑菌落培养物分别接种于赖氨酸脱羧酶培养基及对照培养基培养24-48小时,对照管应为黄色,阴性,试验管呈紫色为阳性。 动力检查:取可疑菌培养物穿刺接种于半固体营养琼脂培养基中,培养24小时,细菌沿穿刺外周生长为动力阳性,否则为阴性。阴性培养物应在室温保留2-3天后再判断。 血清凝集试验:在洁净载玻片一端取沙门菌属O多价1血清2-3环,再取培养物少许,与血清混合,将玻片前后侧动,如出现凝集现象,于0.9%氯化钠溶液和同株培养物作对照试验,无凝集现象时,判为血清凝集阳性,必要时应取斜面培养物制成浓菌悬液,在100℃水浴中保温30分钟,待冷,再作凝集试验,如出现凝集,应判为阳性,否则为阴性。 结果判断:如血清凝集试验阳性,生化试验符合硫化氢阳性,靛基质试验阴性,脲酶试验阴性,赖氨酸脱羧酶试验阳性,动力检查阳性,判检出沙门菌;血清凝集试验阴性,生化试验不符合,判未检出沙门菌。上述各项试验任何一项不符合有可疑反应的培养物,均应进一步鉴定后作出结论。